最佳答案:可以这样来说吧,首先你应该有一条已知的序列,反向引物设计时在序列的5'方向找一段序列然后反向互补作为反向引物,在3'方向直接找一段序列作为正向引物.这样就OK了
最佳答案:这是基础知识问题,请抬头,看本页面的导航栏,找到专题,点击进去有个引物设计专题,把上面的资料都研究透彻了,如果还不会再问.同时你也可以去生物秀论坛pcr实验版块
最佳答案:普通PCR规则:1、18-25 bp;2、Tm值在45-60;3、2个引物之间没有超过5bp的互补序列;4、CG%在40-60%;5、避免连续出现3个以上的CC
最佳答案:第一次的引物再用,效果不好,酶需要一些额外片段来结合在模板上,所以第二对引物要靠里.引物不同,能增加特异性,这也是巢式PCR的意义所在啦.看到图片会更好理解哈:
最佳答案:Oligo dt不需要设计,用试剂盒里面的就行.如果你RT的引物想用自己的,那你需要扩增的基因序列应该是明确的吧.RT的时候'引物没太多的选择性,mRNA序列跟
最佳答案:引物的设计一般要考虑以下几个问题:1.长度,至少要16bp,通常为18-30bp2.解链温度(Tm值)3.避免引物内部或引物之间存在互补序列(3个碱基),从而减
最佳答案:可以使用primer5 或者primerdesign设计 还是主要考虑发夹结构,GC含量,Tm值和引物交叉,还有减少引物二聚体的产生.如果是扩增启动子的话,建议
最佳答案:因为PCR技术得沿着引物向5‘段延伸
最佳答案:你可以找到BAX的基因序列么?如果可以,那么你可以对比不同的转录本确定外显子和内含子的位置,然后依据你所要研究的对象,在不同的外显子上设计引物.不过话说回来,你
最佳答案:又不一定非要从那个基因的头开始P,只要把那个基因整个包含进去就行了,如果你非要刚好从头开始那就只能分段P然后再连啦,其实高度相似不是完全相同吧 还是可以的 毕竟
最佳答案:这些内容在primer5说明书里边儿都有.
最佳答案:正向:5' GTCACCAGAGCGACAGAT 3' 18方向:5' CACAGTAGTAGGTGGCTTCA 3' 20用其他软件设计引物供参考!如有其它要
最佳答案:200一下片段应该是引物二聚体.应该是两个引物对中有各有一个引物位置很近,而另外两个引物距离其引物,一个在1.2K左右,一个在1.5K左右.
最佳答案:1、目的基因序列对应氨基酸序列,为正义连,上游引物即正向引物是该链中的序列,与反义链互补.下游引物是反义链中的序列,与正义链--目的基因序列互补.2、这个问题问
最佳答案:这样还不错.5‘段增加稳定性,3’端最好不要有太多的GC,一般来说,最后5个碱基里不要出现超过2-3个G或者C.因为3‘端是扩增的关键,一旦出现3’端的错配或者
最佳答案:?问题很模糊呵如果扩基因用于表达,一般使用cDNA做为模板,引物设计时要保证产物包含ATG-TGA的编码序列,两者常设计成直接在引物靠3’端,而5'端引入些酶切
最佳答案:Tm值本来就是人为定的一个预测值,三个Tm值代表的是不同的计算方法,常用的是第三种2*AT+4GC.看退火温度时,酶切位点和保护碱基一般是不考虑在内的,因为pc
最佳答案:当然是dna的啦,引物的设计有很多需要注意的地方哦,不然怎么有primer5 、oligo7之类设计引物软件呢.
最佳答案:特定的引物决定了所扩增的DNA片断.引物是人工合成的短DNA片断,一般不超过50个碱基(通常18-25个),它们与所要扩增的DNA片断的起始和终止区域完全互补.
最佳答案:你可以直接送到测序公司,在填写测序单时,填写为测通,测序公司就会直接帮你直接设计引物的.太羡慕你了,我做tail PCR第二轮就只扩出700bp,老板都不给我设