最佳答案:受体细胞经过一些特殊方法 (如:CaCl,RuCl等化学试剂法)的处理后,细胞膜的通透性发生变化,成为能容许多有外源DNA的载体分子通过的感受态细胞(compe
最佳答案:常用的是DH5α和Top10两种菌株.
最佳答案:我们通常是配制80%的甘油,然后高压灭菌备用.用的时候,取一半甘油一半菌液即可,-80保存,复苏没有问题.甘油的终浓度是40%.
最佳答案:A)细菌的生长状态:不要用经过多次转接或储于4℃的培养菌,最好从-80℃甘油保存的菌种中直接转接用于制备感受态细胞的菌液.细胞生长密度以刚进入对数生长期时为宜,
最佳答案:大肠杆菌感受态细胞的制备(CaCl2法) (1) 从新活化的E.coli DH5α菌平板上挑取一单菌落,接种于3~5ml LB液体培养中,37℃振荡培养12h左
最佳答案:感受态细胞的制备及转化平板上菌落的多少主要与两个方面有关:一是感受态的质量;二是质粒与感受态的比例(如果是连接产物.就要看连接效率的高低了)
最佳答案:除了增加细胞通透性之外,第一次还有洗净之前一步残留的LB液体的作用
最佳答案:配制30%的甘油,保存的时候等体积加入感受态细胞中,甘油终浓度为15%.
最佳答案:大肠杆菌细胞表面没有结合DNA的特异性受体存在,金属离子诱导大肠杆菌摄取外源DNA具有一定的特异性.高浓度非生理条件下Ca2+诱导大肠杆菌摄取外源DNA,可能一
最佳答案:不是.虽然菌体浓度越大,细胞的绝对数量越多,但这只是在一定的范围内,感受态的效率主要和菌体的状态有关.制作感受态的菌体最好处于对数期,温度不同,处于对数期的OD
最佳答案:两个目的:①热激后的大肠杆菌细胞比较脆弱,培养可以恢复细胞的活性;②进一步培养,提高菌液中大肠杆菌的浓度.
最佳答案:氯化钙只能制作细菌感受态,酵母菌要用冷的山梨醇洗 .平板筛选毕赤酵母GS115单菌落后,制备1 mL菌液接种于100 mL YPD液体培养基中,30 ℃200