一.目的 了解温度对酶活性的影响 了解pH对酶活性的影响 了解激活剂和抑制剂对酶活性的影响 二.原理 酶的催化活性受温度的影响很大.酶反应在低温时进行较慢,随着温度升高而加快,当达到其最适温度时,酶反应速度最快,以后又随着温度升高而减慢,以至完全停止反应.人的唾液淀 一.目的
了解温度对酶活性的影响
了解pH对酶活性的影响
了解激活剂和抑制剂对酶活性的影响
二.原理
酶的催化活性受温度的影响很大.酶反应在低温时进行较慢,随着温度升高而加快,当达到其最适温度时,酶反应速度最快,以后又随着温度升高而减慢,以至完全停止反应.人的唾液淀粉酶活性随着温度的升高而升高,直到37℃左右,温度更高时酶的活性则下降.通常,测定酶的活力时,在酶反应的最适温度下进行.应当指出,一种酶的最适温度不是完全固定的,它与作用的时间长短有关,一般作用时间长,最适温度低,而作用时间短,则最适温度高.动物酶的最适温度一般为35～40℃,而植物酶的最适温度较高,在40～50℃之间.
酶的活性受环境pH的影响极为显著.通常,各种酶只有在一定的pH范围内才表现它的活性.一种酶表现其活性最高时的pH值,称为该酶的最适pH.低于或高于最适pH时,酶的活性逐渐降低.人的唾液淀粉酶在pH3.9.4之间表现其活性,最适pH约为6.8.不同酶的最适pH值不同.然而,酶的最适pH受底物性质和缓冲液性质的影响.例如,唾液淀粉酶在醋酸缓冲液中的最适pH不是6.8,而为5.6.
酶的活性常常受某些物质的影响,有些物质能使酶的活性增加,称为酶的激活剂；有些物质能使酶的活性降低,称为酶的抑制剂.Cl-是唾液淀粉酶的激活剂.其它的阴离子,如Br-、NO3-和I- 对该酶也有激活作用,但较微弱.而Cu2+对唾液淀粉酶具有抑制作用.激活剂和抑制剂影响酶活性的剂量是很少的,并且常具有特异性.
在本实验中,以稀释的唾液作为淀粉酶液.唾液内的淀粉酶可将淀粉逐步水解成各种不同大小的糊精分子,最终产物为麦芽糖和少量的葡萄糖.它们遇碘呈不同的颜色.直链淀粉（即可溶性淀粉）遇碘呈蓝色；糊精按分子从大到小的顺序,遇碘可呈蓝色、紫色、暗褐色和红色,最小的糊精和麦芽糖遇碘不显颜色：
由于在不同温度,不同pH,或者在有激活剂或抑制剂存在的条件下唾液淀粉酶的活性高低不同,则淀粉被水解的程度不同,所以,可由酶反应混合物遇碘所呈现的颜色来判断,从而可了解上述诸因素对酶活性的影响.但需注意在碱性条件下碘会发生歧化反应,部分碘形成无色的碘酸盐、次碘酸盐,此时应增加碘液加入量.
三.实验材料及设备
1.材料
唾液
2.仪器
恒温水浴 沸水浴 冰浴
3.器材
普通试管：20mL×8
容 量 瓶：100mL×1
移 液 管：1mL×4 2mL×3 5mL×1
烧 杯：250mL×1 50mL×1
温 度 计：1
滴 管：2
洗 耳 球：2
漏斗、洗瓶、试管架、移液管架、玻棒：各1 四.试剂的配制
1.淀粉溶液（0.5%）
称取5g可溶性淀粉,溶于1000mL热水中.（临用前配制）
2.NaCl溶液（0.3%）
3.CuSO4溶液（0.3%）
4.碘液
称取2g碘和3g碘化钾溶于100mL水中.临用前稀释10倍.
5.磷酸缓冲溶液系列（0.2mol/L）：①pH4.8、②pH6.8、③pH9.8
五.操作步骤
1.唾液淀粉酶的制备
(1) 提取：实验者先用水漱口清洁口腔,然后含一小口（约5mL）蒸馏水于口中轻嗽一、二分钟.
(2) 稀释：将酶提取液用水定容至100mL.作为唾液淀粉酶的样品液.
（由于不同人或同一人不同时间收集到的唾液淀粉酶的活性并不相同,稀释倍数可以是50～300倍,甚至超过此范围.）
2.温度对唾液淀粉酶活性的影响
取8支试管,编号,按表一操作,并记录观察到的颜色.
3.pH对唾液淀粉酶活性的影响
取3支试管,编号,按表二操作,并记录观察到的颜色.
4.激活剂和抑制剂对唾液淀粉酶活性的影响
取3支试管,编号,按表三操作,并记录观察到的颜色.
六.结果处理
1.分析表一的结果,并作出温度对唾液淀粉酶活性影响的示意图.
2.分析表二的结果,并作出pH对唾液淀粉酶活性影响的示意图.
3.分析表三的实验结果.
