解题思路：比例尺表示图上距离比实地距离缩小的程度．
1000千米=100000000厘米，根据比例尺公式可知：比例尺=[图上距离/实地距离]，得：图上距离=比例尺×实地距离=[1/40000000]×100000000=2.5厘米．
故选：B．
点评：
本题考点： 地图上的比例尺应用．
考点点评： 本题考查比例尺的应用．
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