网上复制粘贴的就算了吧,根本没明白到底问的是什么就抄了一堆,负点责任行么? 回楼主： 1、我不太明白你所说的“最高温度”是什么?是软件计算引物tm的结果?一般的计算结果都是刚好退火的温度,实验中一般采取比这个温度低5-10度的方法,但肯定不能是一半,那样太低了. 其实退火温度低的目的主要是加强两条DNA间的结合效率,在一定的范围内,温度越低结合效率越高,但是超出了这个范围,就容易产生非特异性结合,形成我们不需要的DNA. 2、其实科学界这种定义挺多的,比如”半衰期“,都是指某些反应进行到一半的时间或温度或别的什么参数.主要是因为这些反应最终的结果都是一样的,比如一段20bp长的DNA和200bp长的DNA,最高温度都是——比如——95度,如果选择这个温度,就无法体现出两者的差异了.但是在解链一半时,这个温度就与长度密切相关,可以表现出两者的差异,所以就采用了这个参数. 有问题欢迎追问.
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