为什么受体细胞中原来没有标记基因?

比如大肠杆菌,我知道如果受体细胞本来就有标记基因的话就无法筛选了,可是标记基因在质粒上,而质粒就是受体细胞中来的不是吗?那不就是标记基因是受体细胞中来的吗?

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质粒是经过人工改造的,标记基因是人工加在质粒上的.

在基因工程中,常用人工构建的质粒作为载体.人工构建的质粒可以集多种有用的特征于一体,如含多种单一酶切位点、抗生素耐药性等.常用的人工质粒运载体有pBR322、pSC101.pBR322含有抗四环素基因(Tcr)和抗氨苄青霉素基因(Apr),并含有5种内切酶的单一切点.如果将DNA片段插入EcoRI切点,不会影响两个抗生素基因的表达.但是如果将DNA片段插入到Hind III、Bam H I 或 Sal I切点,就会使抗四环素基因失活.这时,含有DNA插入片段的pBR322将使宿主细菌抗氨苄青霉素,但对四环素敏感.没有DNA插入片段的pBR322会使宿主细菌既抗氨苄青霉素又抗四环素,而没有pBR322质粒的细菌将对氨苄青霉素和四环素都敏感.pSC101与pBR322相似,只是没有抗氨苄青霉素基因和PstI切点.质粒运载体的最大插入片段约为10 kb(kb表示为千碱基对).

基因工程中所用的质粒一定会和受体细胞中的区别开,以达到筛选的目的.

质粒是染色体外能够进行自主复制的遗传单位,包括真核生物的细胞器和细菌细胞中染色体以外的脱氧核糖核酸(DNA)分子.现在习惯上用来专指细菌、酵母菌和放线菌等生物中染色体以外的DNA分子.在基因工程中质粒常被用做基因的载体.许多细菌除了染色体外,还有大量很小的环状DNA分子,这就是质粒(plasmid).质粒上常有抗生素的抗性基因,例如,四环素抗性基因或卡那霉素抗性基因等.有些质粒称为附加体(episome),这类质粒能够整合进细菌的染色体,也能从整合位置上切离下来成为游离于染色体外的DNA分子.

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