293-T细胞培养实验中注意事项,1.用1640加10%胎牛血清,有的种系用DMEM.血清要求质量较高,在普通血清中细胞生长不太好.1640用双蒸水溶解,按说明加入碳酸氢钠.2.培养液中应加入HEPES,起缓冲pH值的作用,否则会影响细胞状态.如果用20%的HEPES,每次配培养液时每200ml培养液可加入5ml.加入HEPES后1640培养液颜色略呈橘黄色而非暗红色.3.消化所用胰酶可选择0.125%浓度,且不要消化时间太长.也有研究者认为不用胰酶,直接吹打使细胞脱壁,但使用胰酶效果较好.消化时在镜下观察到细胞形态稍有变化即可,不要等形态明显变化后再停止.可以不用加血清终止消化,只要将胰酶倒出来,加上培养液吹打即可.SI核酸酶 http://product.bio1000.com/111602/ 生物帮上面有详细的介绍.
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