如何设计引物(14个结果)

最佳答案：第一次的引物再用,效果不好,酶需要一些额外片段来结合在模板上,所以第二对引物要靠里.引物不同,能增加特异性,这也是巢式PCR的意义所在啦.看到图片会更好理解哈:

最佳答案：可以下载专门设计引物的生物学软件,如primer premier,将已知序列导入该程序,程序会自动生成一条正向引物和一条反向引物,并计算出Tm值.引物的长度在p

最佳答案：可以使用primer5 或者primerdesign设计还是主要考虑发夹结构,GC含量,Tm值和引物交叉,还有减少引物二聚体的产生.如果是扩增启动子的话,建议

最佳答案：DNA合成,新链的延伸方向是5→3因此,需要在5端加上酶切位点记得再加上一些保护碱基,因为内切酶除了有特异的识别位点之外,还需多几个无需特异性的碱基提供一个pl

最佳答案：你问问实验室的同学肯定有人有电话的

最佳答案：?问题很模糊呵如果扩基因用于表达,一般使用cDNA做为模板,引物设计时要保证产物包含ATG-TGA的编码序列,两者常设计成直接在引物靠3’端,而5'端引入些酶切

最佳答案：引物：引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度.理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链

最佳答案：又不一定非要从那个基因的头开始P,只要把那个基因整个包含进去就行了,如果你非要刚好从头开始那就只能分段P然后再连啦,其实高度相似不是完全相同吧还是可以的毕竟

最佳答案：设计引物用专业软件如DNA STAR,PRIMER 5,设计好之后加上你提到的限制性内切酶的酶切位点即可

最佳答案：首先要知道这段基因的序列,然后可以用软件来设计,如Primer我就知道这个,看到别人用,很好推荐

最佳答案：把其中的一个引物的长度增加,让两个引物的Tm值接近一些好了.

最佳答案：NCBI nucleotide栏输入目的基因英文名称出来后,选择mus还是rat则是看你做小鼠还是大鼠,你是做大鼠当然是后者.另外你是做DNA还是cDNA,

最佳答案：可以所它设计成相应的酶切位点.PCR后酶切验证.

最佳答案：找亲缘性最好的物种,看看能不能找到它们的序列,或者看看有没有人发这方面的文章又或者,用oligo dT反转录,然后根据亲缘性序列在前端设计引物,看看能不能扩增出