原因很简单,因为spe1和bln1是同尾酶,而你连接的时候,目的基因连接进去的话有两种情况,一种是再次形成spe1和bln1这两个酶切位点,还有一种情况就是你现在的这种情况,spe1和bln1这两个酶切位点都不能形成.你用spe1和bln1这两个酶都是切不开的.
同尾酶虽然能形成同样的粘性末端,但是他们的识别序列是不同的
你自己把序列画出来就知道是什么问题了
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