[生物一现代生物科技专题]必答题
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解题思路:分析图1:图1表示利用基因工程技术将let-7基因导人肺癌细胞的过程,其中①表示基因表达载体的构建过程;②表示细胞的传代培养过程.图2表示let-7基因影响癌基因RAS的表达的原理,let-7基因转录产物miRNA与RAS基因转录产物RAS mRNA结合,使RAS基因翻译受到抑制,引起细胞中的RAS蛋白含量减少,进而导致癌细胞增殖受到抑制.

(1)过程①表示基因表达载体的构建,在该过程中需要用限制性核酸内切酶(简称限制酶)对载体进行切割,以便于目的基因的插入;启动子是一段特殊的DNA序列,是RNA聚合酶识别和结合的位点,RNA聚合酶结合到该位点,可驱动转录过程.

(2)过程②表示动物细胞培养,培养过程中出现接触抑制现象后,可以用胰蛋白酶处理,使之分散成单个细胞,随后分装到新的培养瓶中进行传代培养.

(3)判断目的基因是否在受体细胞中转录,可用分子杂交技术来检测,从细胞中提取mRNA和用放射性同位素或者荧光标记的目的基因单链DNA片段进行杂交.根据题中信息“肺细胞中的let-7基因表达减弱,癌基因RAS表达增强,会引发肺癌”知,导入let-7基因后,肺癌细胞的增殖受到抑制;据图2可知,let-7基因影响RAS基因表达的机理是:let-7基因转录产物miRNA与RAS基因转录产物RAS mRNA结合,使RAS基因翻译受到抑制,引起细胞中的RAS蛋白含量减少,进而导致癌细胞增殖受到抑制.

故答案为:

(1)限制性核酸内切酶(或限制)启动子

(2)胰蛋白

(3)RNARAS蛋白

点评:

本题考点: 基因工程的原理及技术;动物细胞与组织培养过程.

考点点评: 本题考查基因工程的原理和技术、动物细胞与组织培养、遗传信息的转录和翻译的相关知识,要求考生识记基因工程的工具和操作步骤,能分析图1,准确判断各过程的名称;识记动物细胞培养的过程和条件,掌握遗传信息的转录和表达过程,能利用图2信息答题.