解题思路:λ噬菌体DNA中分为三段,左臂是含有编码蛋白质外壳的序列,中臂是控制溶原生长的序列,而右臂是含重要调控序列,所以人工改造载体时,可删除的是中臂.经人工改造λgtl0载体的长度为43.4kb.T2噬菌体侵染细菌的实验步骤:分别用35S或32P标记噬菌体→噬菌体与大肠杆菌混合培养→噬菌体侵染未被标记的细菌→在搅拌器中搅拌,然后离心,检测上清液和沉淀物中的放射性物质.
(1)由于组装噬菌体时,可被噬菌体蛋白质包装的DNA最大长度是51kb,经人工改造λgtl0载体的长度为43.4kb,那么插入的外源DNA的最大长度是7.6kb.由于λ噬菌体DNA中分为三段,左臂是含有编码蛋白质外壳的序列,中臂是控制溶原生长的序列,而右臂是含重要调控序列,所以人工改造载体时,可删除的是中臂.
(2)基因工程中需要用到限制酶和DNA连接酶来切割和拼接DNA片段.由于采用的标记基因,即imm434基因,能编码一种阻止λ噬菌体进入溶菌状态的阻遏物,所以外源DNA应该插入该基因之中,这样就使得经侵染培养后的受体菌处于溶菌状态.
(3)蛋白质与DNA相比,特有的化学元素是S元素,采用放射性同位素标记方法,用被标记的噬菌体侵染未被标记的细菌,短时保温后搅拌、离心,可检测到放射性物质主要分布在试管的上清液中,因为噬菌体中含有S的蛋白质外壳是不进入细菌体内的.
故答案:(1)7.6控制溶原生长(或中部)
(2)限制酶和DNA连接酶之中溶菌
(3)S上清夜
点评:
本题考点: 基因工程的原理及技术;噬菌体侵染细菌实验.
考点点评: 本题综合流程图,考查基因工程、噬菌体侵染细菌实验的应用,意在考查考生分析题图提取有效信息的能力;能理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系的能力;能运用所学知识,解决生物学问题的能力和迁移应用能力.