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免疫共沉淀和GST pull down技术各有何优势

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都是用来研究蛋白质相互作用的技术

免疫共沉淀的话蛋白质是处于天然状态,蛋白质的相互作用可以在天然状态下进行,可以避免认为影响,还可以分离得到天然状态下相互作用的蛋白复合体.

但是问题是两种蛋白质的结合可能不是直接结合,而可能有第三者在中间起桥梁作用；而且必须在实验前预测目的蛋白是什么,以选择最后检测的抗体,如果抗体选错了就没有结果.

GST pull-down是将GST融合蛋白作为探针固化到凝胶柱上,与溶液中的目的蛋白结合.可以用来确定融合（或探针）蛋白与未知（或靶）蛋白间的新的相互作用,证实探针蛋白与已知蛋白质间可疑的相互作用.

但问题是这个方法可能会出现假阳性.也就是也许是因为电荷作用的影响造成的吸附,而不是生理性的相互作用.

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