纸层析法又称纸色谱法.以纸为载体的色谱法.固定相一般为纸纤维上吸附的水分,流动相为不与水相溶的有机溶剂；也可使纸吸留其他物质作为固定相,如缓冲液,甲酰胺等.将试样点在纸条的一端,然后在密闭的槽中用适宜溶剂进行展开.当组分移动一定距离后,各组分移动距离不同,最后形成互相分离的斑点.将纸取出,待溶剂挥发后,用显色剂或其他适宜方法确定斑点位置.
纸层析法依据极性相似相溶原理,是以滤纸纤维的结合水为固定相,而以有机溶剂作为流动相.由于样品中各物质分配系数不同,因而扩散速度不同,从而达到分离的目的.
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