免疫细胞化学技术常用的标记物有哪些?
1个回答
博凌科为免疫细胞化学技术是用已知的抗体检测组织与细胞中相应抗原的方法,但抗原抗体相结合的复合物在显微镜下是看不见 的,必须用特殊的标记物对抗体或抗原抗体复合物进行标记,才能使抗原抗体复合物在显微镜下具有可见性.常用的标记物有以下几种：⑴ 荧光素 用荧光素标记已知 抗体,再与组织或细胞中的相应抗原结合,在荧光显微镜下检测荧光素所发荧光,便可知抗原的分布部位,常用的荧光素有绿色 荧光的异硫氰酸荧光素和红色荧光的罗达明B200等.⑵ 酶 用酶标记已知抗体,再 与组织或细胞中的相应抗原结合,利用酶细胞化学方法显示该标记酶以达到显示抗原的目的.常用的标记酶如辣根过氧化物酶（horseradish peroxidase）与其底物H2O2和 氨基联苯胺相遇时,形成的棕色沉淀可在光镜下观察到,遇锇酸反应后形成锇黑电镜下呈高电子密度.⑶ 胶体金 将 胶体金与抗体结合形成金标记抗体,再与相应的抗原结合,形成显微镜下可见的电子致密的金颗粒.常用的胶体金颗粒直径为5～60nm.⑷ 亲和物质 亲 和物质是一种有多价能力的物质,不仅与另一种亲和物质有高度的亲和力,而且可与抗体蛋白及各种标记物如荧光素、酶、胶体金等结合,因而可以通过荧光显微镜、酶加底物显色反应等定位某种特异分子.常用的亲和物质系统有生物素－亲和素系统、葡萄球菌A蛋白－免疫球蛋白系统.⑸ 铁蛋白 将 铁蛋白通过一种低分子的双功能试剂与抗体相结合,它既保留了抗体的免疫活性又具有显微镜下可见的高电子密度核心.
