限制性内切酶能切割DNA单链吗?
大多数内切酶对只含识别序列的寡核苷酸是不具催化效应的,例如仅含GAATTC的寡核苷酸是不能被EcoRⅠ切割,只有在GAATTC寡核苷酸序列两侧个延长一个或几个才能.因此人工设计合成EcoRⅠ的衔接物不是GAATTC而是GGAATTCC.
主要是上述这句话而想起来的.
限制性内切酶只能识别并切割特异的双链DNA序列,这种能被特异性识别的切割部位都具有回文序列,也就是在切割部位,一条链正向读的碱基顺序与另一条链反向读的顺序完全一致.我们在说一个限制性内切酶例如EcoRⅠ的酶切位点时,只是为了方便只提GAATTC,但此处的GAATTC是包含双链信息的(另一条链5'到3'的序列也是GAATTC).两边加接头碱基并不影响酶的识别特异性.
总之,一般来说,限制性内切酶不能切割DNA单链,除非单链内部形成了局部的回文结构(可以认做某种意义上的双链)恰好是限制性内切酶的切点.
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