一段基因序列经扩增后,克隆到载体中进行测序.在两个层次上可能导致序列发生变化.首先在PCR扩增过程中就可能产生错误.将片段克隆到载体中也有可能发生突变.其次,测序的准确率问题.ABI公司承诺其仪器的测序精度在一定范围内可以达到98.5%以上.由于仪器准确率的限制,在一个较 长的序列中发生碱基序列错误是难以避免的.在确认克隆无误的情况下,通过双向测序可以最大限度 减少测序的错误.您如果想得到您的最准确的序列,进行双向测序是很有必要的.只进行简单的单向测序,我们无法保证所测序列的完全准确性,这是由仪器的精度决定的.--------转自三博远志网站(测序FAQ)
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