功能研究,最重要的就是活性了.
首先,要有一种简便快速的测活方法,以便随时检测活力.
其次,全程注意防止变性失活.一般是保持低温操作.
所用方法一般尽量采用基于不同原理的分离手段,以便适于不同阶段需求,除去各种不同性质的杂质.初期多采用适于大体积样品的方法,如沉淀法等.这样可以快速减少体积,便于后期层析、电泳等操作.后期一般采用高分辨率的方法,以除去性质相近的杂质.
方法好坏一般用活力回收和纯化倍数来评价,二者有一个平衡,具体与实验对于最终纯度的要求、材料来源等都有关系.比如,样品廉价易得,就优先考虑提纯倍数;样品珍贵,就要多考虑活力回收.