酵母双杂交系统有哪些优缺点
1个回答

1、高敏感性.原因:

①采用高拷贝和强启动子的表达载体,使融合蛋白过量表达;

②激活结构域和结合结构域结合形成转录起始复合物,之后又与启动子结合,此三元复合体使融合蛋白各组分间结合更趋于稳定;

③通过mRNA使信号放大;

④检测的结果是基因表达产物的累积效应,可检测存在于蛋白质间的微弱或暂时的相互作用.

2、真实性.检测在活细胞内进行,作用条件与作用力无需模拟,在一定程度上代表细胞内的真实情况.

3、简洁性.融合蛋白相互作用后,减少了制备抗体和纯化蛋白质的繁琐步骤.

3、广泛性.采用不同组织器官细胞类型和分化时期的材料构建cDNA文库,能分析不同亚细胞部位和功能的蛋白质,适用于部分细胞质、细胞核及膜结合蛋白.