His-taq纯化蛋白不挂柱子,可能的问题是什么?求高人指点.
2个回答
有这么几个可能
1、你western检测的到目标蛋白的标签吗?如果你的目标蛋白折叠的时候将你的HIS标签包裹进了蛋白内,HIS抗体是检测不到的.因此,即使你表达出来目标蛋白,没有标签怎样能挂上呢?
2、你的WASHBUFFER即洗杂蛋白的缓冲液的咪唑浓度过高,将目的蛋白冲洗了下去,待你洗脱的时候发现什么都没有挂上了.
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