下列关于基因工程操作步骤的叙述，错误的是（ ）
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解题思路：（1）基因工程的三个工具：限制酶、DNA连接酶、运载体．
（2）四个步骤：
①目的基因的获取：常用的方法有从基因文库中获取、逆转录法、PCR技术扩增、化学合成法等．
②基因表达载体的构建：常用同种限制酶切割运载体和目的基因之后，用DNA连接酶连接．
③将目的基因导入受体细胞：植物细胞常用的有农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法；动物常用显微注射法；微生物常用钙离子处理法．
④目的基因的检测与表达：分子水平的检测有DNA分子杂交技术检测目的基因存在、分子杂交技术检测是否转录、抗原抗体杂交技术检测基因是否表达，还有个体水平的检测等．
A、用PCR技术扩增目的基因的过程是依据体内复制的原理，根据DNA热变性的特点进行复制，以独特的双螺旋结构为模板，根据碱基互补配对原则准确复制，需发生碱基互补配对，A正确；
B、两种DNA黏性末端的黏合不但要通过碱基互补配对形成氢键，还要依赖于DNA连接酶的作用，连接片段中的磷酸二酯键，B错误；
C、将目的基因导入受体细胞的过程中，植物细胞常用的有农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法；动物常用显微注射法；微生物常用钙离子处理法，不发生碱基互补配对，C正确；
D、目的基因表达过程中，要先进行转录再翻译成相应的蛋白质，转录时以DNA的一条链为模板，根据碱基互补配对原则进行，发生碱基互补配对，D正确．
故选：B．
点评：
本题考点： 基因工程的原理及技术．
考点点评： 本题主要考查与基因工程相关的知识，如目的基因的获取等基因工程的操作程序，意在考查考生能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释并做出合理判断得出正确结论的能力．
