Fermentas公司的研究表明,限制性内切酶在 PCR扩增体系中仍然有部分活性,可以通过稀释（3倍以上）扩增混合液,适当提高酶量和反映时间,进行酶切.个人认为需要对PCR产物进行酶切分析通常是为了或基因表 型分析,由于Taq,Pfu等高温聚合酶在酶切温度（37度或更高）下,仍然保持一定的活性,高温聚合酶所具有的聚合或无模板添A或外切修正的功能仍在一 定的程度上表现出来,可能会影响到酶切产物末端的正确性.结果是要么装不上去,要么装上去切不下来,测序发现末端引物碱基少了.正确安全的做法是先通过琼 脂糖电泳回收产物,然后酶切,酶切可以适当提高酶的用量.
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