解题思路：解答本题需掌握：（1）灭菌的方法主要有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌．灼烧灭菌适合于接种工具的灭菌，一般来说是在操作过程中金属类的接种工具．干热灭菌适合于玻璃器皿、金属工具的灭菌．高压蒸汽灭菌适合于玻璃器皿、接种工具以及培养基．特别注意培养基的灭菌只能用高压蒸汽灭菌．
（2）微生物的营养物质有5类，分别是水、无机盐、碳源、氮源及特殊生长因子．
（3）培养基的分类及用途
划分标准
培养基种类
特点
用途
物理性质
液体培养基
不加凝固剂
工业生产
固体培养基
加凝固剂，如琼脂
微生物的分离、鉴定、活种计数、保藏菌种
化学成分
天然培养基
含化学成分不明确的天然物质
工业生产
合成培养基
培养基成分明确（用化学成分已知的化学物质配成）
分类、鉴定
用途
选择培养基
培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物生长
培养、分离出特定的微生物（如培养酵母菌和霉菌，可在培养基中加入青霉素；培养金黄色葡萄球菌，可在培养基中加入高浓度的食盐）
鉴别培养基
根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品
鉴别不同种类的微生物，如可用伊红-美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌（若有，菌落呈深紫色，并带有金属光泽）
（4）微生物的分离
①依据某些微生物的特殊营养需求设计培养基．例如利用以纤维素或石蜡作为唯一碳源的选择培养基，可以从混杂的微生物群体中分离出分解纤维素或石蜡油的微生物；缺乏氮源的选择培养基可用来分离固氮微生物；分离自养型的微生物在培养基中不加碳源即可，因为自养型的微生物能够利用空气中的碳源（二氧化碳）．
②在培养基中加入某种化学物质，这种化学物质没有营养作用，对所需分离的微生物无害，但可以抑制或杀死其他微生物．例如分离金黄色葡萄球菌时，在培养基中加入7.5% NaCl，金黄色葡萄球菌可耐高浓度 NaCl，经过培养以后，能够生长的可能就是金黄色葡萄球菌，再通过进一步鉴定加以确定；从土壤中分离放线菌时，可在培养基中加入10%的酚数滴，抑制细菌和真菌的生长；从细菌中分离酵母菌时，可在培养基中加入抗生素，则细菌不能生长，而酵母菌能够生长．
（1）微生物分离实验的过程中常用的仪器有锥形瓶、培养皿、高压灭菌锅、超净工作台、接种环（针）、涂布器等．
（2）培养基中必须添加的微生物的营养物质有5类，分别是水、无机盐、碳源、氮源及特殊生长因子，故选AD．
（3）该实验中苯酚作为细菌培养唯一的碳源，步骤③和④中的培养基最主要的成分差异是后者添加了琼脂，培养基需用高压蒸汽灭菌，其具体要求是121℃，1.05kg/cm2，15～30分钟．
（4）利用平板划线法接种时，由图可知，划线顺序应为甲→乙→丙，最终可以得到由一个细胞繁殖而来的单个菌落．
（5）步骤④的目的是分离纯化菌种，经过步骤⑤培养后，应该从残余苯酚浓度最低的培养瓶中再分离、再培养目的菌株．
故答案为：（1）高压灭菌锅、超净工作台、接种环（针）
（2）A、D
（3）碳源琼脂 121℃，1.05kg/cm2，15～30分钟
（4）甲→乙→丙 单个菌落
（5）分离纯化最低
点评：
本题考点： 微生物的分离和培养．
考点点评： 微生物这部分内容是选修一的热点，在考查选修一的知识点的时候，为了增加考查的知识点的面，命题人往往将微生物、酶、植物有效成分的提取相关的知识点组合在一起进行考查，在复习一定要注意之间的联系．
