解题思路:基因工程技术的基本步骤:
(1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成.
(2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等.
(3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样.将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法.
(4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术.个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等.
苏云金芽孢杆菌的抗虫基因是目的基因,仅将目的基因插入载体质粒中,目的基因没有表达,再在插入目的基因的质粒中插入启动子,目的基因还是没有表达,最后在有启动子、目的基因的质粒中插入终止子,目的基因成功表达,这说明作为目的基因的运载体应具备目的基因、启动子、终止子,为了便于筛选出含有目的基因的受体细胞,还要求运载体上有标记基因.
故选:D.
点评:
本题考点: 基因工程的原理及技术
考点点评: 本题考查基因工程的原理及技术,要求考生识记基因工程的原理及操作步骤,掌握各操作步骤中的相关细节,能结合题干信息作出准确的判断,属于考纲识记和理解层次的考查.