二硝基水杨制备麻烦,成本高,操作繁琐,一般菲林试剂就可以了
DNS即二硝基水杨酸法是利用碱性条件下,二硝基水杨酸(DNS)与还原糖发生氧化还原反应,生成3-氨基-5-硝基水杨酸,该产物在煮沸条件下显棕红色,且在一定浓度范围内颜色深浅与还原糖含量成比例关系的原理,用比色法测定还原糖含量的.因其显色的深浅只与糖类游离出还原基团的数量有关,而对还原糖的种类没有选择性,故DNS方法适合用在多糖(如纤维素、半纤维素和淀粉等)水解产生的多种还原糖体系中.
DNS试剂配制
(1)以称取3,5-二硝基水杨酸(C7H4N2O7)6.3 g,氢氧化钠 21.0 g充分溶解于500 ml蒸馏水中(水先煮沸10分钟后冷却)
(2)加入酒石酸钾钠(C4H4O6KNa·4H2O)182.0g,苯酚(在50℃水中融化) 5.0g,偏重亚硫酸钠(NaS2O5)5.0g,搅拌至全溶,定容至1000 ml.
(3)充分溶解后盛于棕色瓶中,放置10天后便可使用.平时盛一小瓶放在外面使用,其它储于冰箱中.此溶液每月配制一次.
注意:DNS一定要在配制结束后立即转移到小棕色瓶中,同时,使用过程中尽量减少与空气接触.