博凌科为生物科技-为你1、1 ml的PBS可能溶不了那么多细胞(如果你细胞多的话),所以建议用3 mlPBS,分两管装,离完心后用Trizol溶解合成一管2、离心的速度太大了,细胞会死的,建议800 转,5 分钟,一般的细胞都可以离下来3、需要去上清,如果是提RNA就用Trizol溶解合成一管,然后放在-80度冰箱,如果提蛋白就直接将离心后的细胞放在-80度冰箱.上清对于 提蛋白和RNA没什么影响.还有一点,提RNA的东西一定要高压,如果是初次做可以用DEPC水泡枪头,可以提高作成功的几率.如果操作严格,可以只把要 用的枪头和EP管高压即可.其他的没什么特别的,流程跟你写的是一样的.
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